天狼猩红染色简介:
天狼猩红是强酸性染料,易与胶原分子中的碱性基团结合,提高分辨率,从而区分两型胶原纤维。其溶剂为衬染PA饱和溶 液,主要用于各种组织病变时,对胶原纤维异常或纤维增生的组织纤维染成红色。
天狼猩红染色实验意义:
主要用于各种组织病变时对胶原纤维异常或纤维增生的研究中,在偏振光镜下对各种纤维化病变的分型和分级研究有一定的 帮助作用。
实验步骤:
(1)石蜡切片脱蜡至水:依次将切片放入二甲苯 I 20min-二甲苯II 20min-无水乙醇I 10min-无水乙醇II 10min-95%酒精 5min-90%酒精5min-80%酒精5min-70%酒精5min-蒸馏水洗。
(2)天狼猩红染液浸染:将水洗过的切片入天狼猩红染液浸染1h。
(3)酒精分化脱水:片子直接入纯酒精分化脱水。
(4)透明封片:二甲苯I 5min-二甲苯II5min中脱水透明,中性树胶封片。
染色结果:
应用偏光显微镜观察胶原纤维:
I型胶原纤维:紧密排列,很强双折光性,纤维呈红色;
II型胶原纤维:弱双折光性,纤维呈多种颜色网状分布;
III型胶原纤维:弱双折光性,纤维呈绿色;
IIII型胶原纤维:弱双折光性,纤维呈淡黄色。
实验技巧:
(1)天狼猩红染色易掉色,应及时封片。
(2)注意染液的使用情况
偏振光
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