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iTRAQ&TMT

同位素标记定量: 

iTRAQ(isobaric Tags for Relative and Absolute Quantitation)&TMT(Tandem Mass Tags)分别由AB Sciex公司和 Thermo公司研发的多肽体外标记定量技术,利用多种同位素试剂标记蛋白多肽N末端或者赖氨酸侧链基团,不同分子量的试 剂对不同来源的样品进行标记从而实现不同样品间蛋白质组的比较。 

iTRAQ实验步骤: 

1.样品准备:将待测样品进行定量计算出样品蛋白浓度; 

2.蛋白还原烷基化及酶解:每组样品各取100μg按照iTRAQ试剂盒要求进行处理,使用测序级胰蛋白酶溶液酶解后,超滤管 离心收集酶解肽段; 

3.iTRAQ标记:将iTRAQ试剂平衡到室温,用150μL异.丙.醇溶解,取酶解肽段加入iTRAQ试剂后室温反应2 h,加入水终止 反应,等量混合不同组样品,真空冷冻干燥样品; 

4.LC-MS-MS分析:使用Thermo的Q-Exactive Orbitrap进行串联质谱鉴定。 

5. 数据处理及生信分析


结果展示:


实验周期及交付标准 

1.实验周期:4-6周 

2.交付标准:蛋白定量结果、鉴定结果、质谱原始数据、生信分析结果(GO分析、KEGG分析等等) 

需确认的信息 

1.样本的种属 

2.样本的类型(组织or细胞or血液) 

3.样本的数量及分组 

4. 分析要求


欢迎咨询详谈,我们会根据您的方案及需求制定详细的服务协议。 

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