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脑缺血及再灌注模型动物实验

脑缺血在临床上具有较高的发病率和死亡率,严重危害中老年患者健康,寻找有明确疗效且作用机制清晰 的预防和治疗脑梗死的药物是当前研究的前沿课题和热点领域。因此,脑缺血动物模型的制备在科学研究中具有重要意义。 

MCAO 模型制备: 

术前准备见左图,选择 220-250g 的 SD 大鼠,10% 水合氯醛(300uL/100g)麻醉保定,仰卧位,颈部正中剃毛消毒备用 


剪开颈部皮肤,钝性分离颈部肌肉,暴露并游离单侧颈动脉,穿线备用 


动脉夹暂时夹闭主动脉,并结扎颈外动脉。主动脉用注射器针头挑开小口,插入自制线栓到颈内动脉,大约 2.5-3cm。结扎颈内动脉,结扎主动脉近心端,松开动脉夹。 


逐层缝合,根据实验的需要的缺血时间进行拔栓手术(再灌注),拔栓时动物要完全麻醉,把出线栓的长度约为 0.5cm。

模型成功的评判方法 

神经功能缺损(NDS)评分 

0 分:活动基本正常,无明显神经病学症状; 

1 分:左侧前爪无法完全伸展; 

2 分:爬行时向左侧转圈; 

3 分:行走时向偏瘫侧倾倒; 

4 分:不能自动行走,有意识障碍 

5 分:死亡 


水迷宫实验 Morris 水迷宫(Morris water maze, MWM)实验是一种强迫实验动物(大鼠、小鼠)游泳,学习寻找 隐藏在水中平台的一种实验,主要用于测试实验动物对空间位置感和方向感(空间定位)的学习记忆能力。(左图正常,右图模型) 
TTC 染色 TTC 染色是常用来评价脑缺血损伤的指标,缺血区域会呈白色。 


HE 染色 一般发生缺血损伤的脑组织的神经元细胞会受到明显损伤(上侧正常,下侧损伤) 



TUNEL 染色发生损伤的脑组织,TUNEL 染色的细胞会明显增多。 




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