番红O固绿染色服务介绍:
番红O固绿染色(软骨)在涉及关节软骨及软骨下骨的形态学研究中,常需要联合使用多种染料以显示其组织学结构。其中,起源于上世纪60年代的番红O(safranin O)-固绿(fast green)染色因可以直观反映关节软骨、软骨下骨和骨组织的 结构而备受青睐。软骨呈红色,成骨呈绿色。
番红O固绿染色实验意义:
番红O固绿染色染色是针对软骨及植物进行染色的方法,此方法简易,节约时间、用具器皿及药品,染色清晰。
实验步骤:
1.软骨染色步骤:
①骨组织固定、脱钙,制成石蜡切片。 ②切片常规脱蜡至水。 ③入新鲜配制的weigert染液染色。 ④流水冲洗。 ⑤酸性乙醇分化液分化。 ⑥蒸馏水洗。 ⑦在固绿染色液内浸染。 ⑧蒸馏水洗。 ⑨入番红O染液内浸染。 ⑩蒸馏水洗。 ⑪用乙酸溶液洗涤切片,以便去除残留的固绿,再用蒸馏水洗。 ⑫分别用95%乙醇、无水乙醇脱水。 ⑬二甲苯透明,中性树脂封固。 ⑭镜检。
2.植物染色步骤:
①标本的处理:固定,切成石蜡切片。 ②粘片。 ③脱蜡:二甲苯→50%二甲苯+50%乙醇→100%乙醇→95%乙醇→85%乙醇→70%乙醇→50%乙醇→30%乙醇→水。 ④入番红O染色液染色。 ⑤酸性乙醇分化液分化15s。 ⑥脱色:35%乙醇→50%乙醇→70%乙醇→80%乙醇。 ⑦水洗1min。 ⑧入固绿染色液内浸染,蒸馏水洗1min。 ⑨无水乙醇脱水3-5min,无水乙醇脱水,50%二甲苯+50%乙醇透明5min,二甲苯5min。 ⑩树脂封固。
染色结果:
(1)软骨染色结果: 软骨基质深红色;软骨细胞核蓝色;细胞浆、肌肉、胶原纤维及骨组织呈灰绿色。
(2)植物染色结果: 木质化、木栓化的细胞壁染成红色;纤维素细胞壁染成绿色;导管染成红色,筛管染成绿色。
实验技巧:
(1)软骨染色: 固绿与胶原纤维结合,不宜褪色,番红o-固绿染色的分化很关键,分化过度容易导致切片不着色,分化不足易导致切片着色 过深。
(2)植物染色: 番红染色后,在50%乙醇中脱色需经实践,如果脱色不够绿色会不好染;脱色过度会导致红色过淡,甚至全部绿色。
番红O固绿染色样片参考:
收费标准/服务周期/提供结果:
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